技术特征：

1.一种有助于降低酒精性肝损伤危害功能及増强免疫力的保健品，其特征在于，以1000粒计，包含如下物质及其含量:三七粉150-250g，灵芝、葛根、余甘子、枳具子和枸杞子提取、滤过、浓缩后干膏粉150-250g。

2.根据权利要求1所述的有助于降低酒精性肝损伤危害功能及增强免疫力的保健品，其特征在于，以1000粒计，包含如下物质及其含量:三七粉200g，灵芝、葛根、余甘子、枳具子和枸杞子提取、滤过、浓缩后的干膏粉200g。

3.根据权利要求1所述的有助于降低酒精性肝损伤危害功能及增强免疫力的保健品，其特征在于，所述灵芝、葛根、余甘子、枳具子和枸杞子的用量配比:灵芝400-500g，葛根500-600g，余甘子550-650g，枳椇子300-400g，枸杞子400-500g。

4.根据权利要求1所述的有助于降低酒精性肝损伤危害功能及增强免疫力的保健食品，其特征在于，所述组合物可制成片剂、颗粒剂、硬胶囊剂或软胶囊剂。

5.根据权利要求1所述的有助于降低酒精性肝损伤危害功能及增强免疫力的保健食品的制备方法，其特征在于，所述方法步骤包括:

步骤一、灵芝、葛根、余甘子、枳具子和枸杞子经挑选、洗净，制成净药材，加10倍量水提取3次，每次1小时，滤过，合并滤液；

步骤二、对步骤一中的滤液浓缩至相对密度为1.30-1.35的清膏；

步骤三、步骤二中的清膏在70℃真空环境下进行干燥，粉碎，过筛，制得干膏粉；

步骤四、三七粉过80目筛制得三七细粉；

步骤五、将三七细粉和步骤三中的干膏粉混合30分钟，用80％乙醇制软材过筛制粒，干燥后过筛整粒，制得半成品颗粒；

步骤六、半成品颗粒送入胶囊填充机中，胶囊填充，制得胶囊剂。

技术总结

本发明提供了一种减除芥子酸提升萝卜硫苷含量的莱菔子炮制方法，炮制温度130℃，炮制时间10min本发明通过炮制方法，减除了莱菔子中的有害成分，提升了活性成分的含量。使莱菔子炮制品的治疗活性增加，同时满足安全性要求。

技术研发人员：王计瑞;高思佳;程磊;张小梅;谭春斌;秦伟瀚;阳勇;郭延垒;王云红;李卿

受保护的技术使用者：重庆市中药研究院

技术研发日：2020.11.13

技术公布日：2021.05.25

本发明涉及一种中药炮制方法，更具体的说涉及一种减除芥子酸提升萝卜硫苷含量的莱菔子炮制方法。

背景技术：

莱菔子为十字花科植物萝卜.的成熟种子。本品为十字花科植物萝卜.的成熟种子。本草纲目禾其可“下气定喘，治痰，消食，除胀，利大小便，止气痛，下痢后重，发疮疹”。

中医认为，莱菔子味辛甘，性平，功专消食、降气、化痰。古称“莱菔子治痰，有推墙倒壁之功。”名医张锡纯对它颇多赞誉，认为“无论或生或炒，皆能顺气开郁，消胀除满，此乃化气之品，非破气之品。”《本草纲目》也说：“莱菔子之功，长于利气。生能升，熟能降，则吐风痰，散风寒，发疮疹；降则定痰喘咳嗽，调下痢后重，止内痛，皆是利气之效。”莱菔子的功效与作用有消食化积、除胀行滞，尤以消面积食滞为特长。凡食积气滞而见嗳腐吞酸，甚至腹胀疼痛者尤为适宜。常配伍山楂、神曲、半夏、陈皮等同用。小儿便秘，用炒莱菔子研极细末，每次取5～9克，加白糖适量冲泡后饮用，较小的婴幼儿可减量拌奶粉或稀饭食用，发挥润下通便的作用，易为小儿接受莱菔子味辛能行能散，降气化痰，莱菔子的功效与作用对肺气不降之咳喘尤为适宜，常与白芥子、紫苏子等配伍。莱菔子的功效与作用还有可消除“误服补剂”所出现的一些不良反应。中医认为，人参不能和莱菔子一起服用。人参补气易壅滞，莱菔子顺气易化气，所以药力容易抵消或发生不良反应。现代研究发现，莱菔子的功效与作用有降压及抗炎作用，对链球菌、葡萄球菌、肺炎球菌、大肠杆菌、痢疾杆菌、伤寒杆菌及多种致病性皮肤真菌均有抑做法用。还可用于治疗骨质增生、湿疹、小儿疳积、子宫功能性出血等病。马春艳等从报道莱菔子中含有胡萝卜苷(ⅱ),腺苷(ⅲ),芥子酸(ⅳ),莱菔硫苷(ⅴ),邻羟基苯甲酸(ⅵ),s-6-(-finyl)-3--2-(ⅶ),β-d-(3-芥子酰基)果糖基-α-d-(6-芥子酰基)葡萄糖苷(ⅷ)等成分(马春艳,,窦德强.辽宁产莱菔子化学成分研究*[j].广州化工,2020,(第2期))。其中芥子酸为一种致癌的有害成分。

技术实现要素：

针对莱菔子生品中的成分中含有芥子酸等有害成分，本发明提供了一种减除芥子酸提升萝卜硫苷含量的莱菔子炮制方法，在炮制温度超过110℃条件下，炮制时间超过20min。

炮制温度110℃，炮制时间20min-80min。

炮制温度130℃，炮制时间0min-40min。

炮制温度130℃，炮制时间10min。

采用中药炮制炒药机制备。

本发明的有益技术效果是：本发明通过炮制方法，减除了莱菔子中的有害成分，提升了活性成分的含量。使莱菔子炮制品的治疗活性增加，同时满足安全性要求。

附图说明

图1药典方法测定不同炒制温度-时间莱菔子中芥子碱硫氰酸盐的含量；

图2不同炒制温度-时间莱菔子的含量测定结果；

图3不同炒制温度-时间莱菔子中萝卜硫苷的含量测定；

图4不同炒制温度-时间莱菔子中芥子酸硫氰酸盐的含量测定；

图5不同炒制温度-时间莱菔子中莱菔素的含量测定；

图6不同炒制温度-时间莱菔子中芥子酸的含量测定；

图7不同炒制温度-时间不同提取方法对比莱菔子中芥子碱硫氰酸盐的含量测定；

图8生品中芥子碱硫氰酸盐的含量对比图；

图9炒制品中芥子碱硫氰酸盐的含量对比图；

图10药典方法测定莱菔子炒制前后芥子碱硫氰酸盐的含量对比；

图11水提取测定莱菔子炒制前后芥子碱硫氰酸盐的含量对比；

图12对照品(a)、s12(b)、c12(c)色谱图；

图13市售莱菔子生品中芥子碱硫氰酸盐、莱菔素和芥子酸的含量对比图；

图14市售莱菔子炒制品中萝卜硫苷、芥子碱硫氰酸盐的含量对比图；

图15不同炒制温度-时间莱菔子的含量测定结果；

图16不同炒制温度-时间莱菔子水提样品整体图谱；

其中，图12中1-萝卜硫苷，2-芥子碱硫氰酸盐，3-莱菔素，4-芥子酸。

具体实施方式

实施例1不同炒制温度-时间莱菔子中化学成分的研究

按照拟定的炮制工艺对样品进行炮制，得莱菔子炒制样品，对其生品和炒制后样品中芥子碱硫氰酸盐和萝卜硫苷进行含量测定，同时对其生品和不同炒制温度-时间莱菔子样品进行特征图谱的研究，标定不同炒制温度-时间莱菔子的特征峰，归属色谱峰，研究不同炒制温度-时间对莱菔子化学成分的影响。

基于药典方法测定不同炒制温度-时间莱菔子中芥子碱硫氰酸盐的含量

对同一批生莱菔子及其炒制后的16个莱菔子中的芥子碱硫氰酸盐进行含量测定，同时作图不同炒制温度-时间莱菔子中芥子碱硫氰酸盐的含量与生品进行对比，测定结果见表1和图1。

表1药典方法测定不同炒制温度-时间莱菔子中芥子碱硫氰酸盐的含量(n＝2)

基于水提取同时测定不同炒制温度-时间莱菔子中萝卜硫苷、芥子碱硫氰酸盐、莱菔素和芥子酸的含量。

对同一批生莱菔子和炒制后16个莱菔子中萝卜硫苷、芥子碱硫氰酸盐、莱菔素和芥子酸的含量进行测定，测定结果见表2，不同炒制温度-时间莱菔子中萝卜硫苷、芥子碱硫氰酸盐、莱菔素和芥子酸含量分别作图见图2-7，生莱菔子及不同炒制温度-时间莱菔子中芥子碱硫氰酸盐的含量见图12。

表2不同炒制温度-时间莱菔子的含量测定结果(n＝2)

从表2和图2-7可以看出，莱菔素在120℃炒10min、20min、30min、40min中含量变化不大，在160℃炒10min、20min、30min、40min时和200℃炒10min含量略高于120℃炒制相应温度，在200℃炒20min时含量迅速下降，200℃炒30min时由于温度过高，被破坏，未能检出；芥子酸在120℃炒10min、20min、30min、40min和160℃炒10min时含量变化不大，160℃炒20min开始含量下降一倍，在160℃炒20min、30min、40min时和200℃炒10min时含量保持不变，在200℃炒20min时由于温度过高，被破坏，未能检出。

据文献报道，莱菔子生品研磨冲服或者温水调服过程中化学成分会发生酶(芥子酶)解，加热炒制可抑制其所含硫代葡萄糖苷分解酶的活性，从而达到杀酶保苷的效果，发挥莱菔子生升熟降，生熟异治的功效，从表10和图10-11可以看出，120℃炒10min、20min、30min、40min和160℃炒10min、20min、30min、40min，200℃炒10min时水提样品未能检出萝卜硫苷，200℃炒20in时开始抑制硫代葡萄糖苷酶(芥子酶)，水提取样品能检出少量萝卜硫苷，但仅抑制部分芥子酶，未能完全杀灭芥子酶，在240℃炒10in时萝卜硫苷的含量达到峰值，表明该温度完全灭活芥子酶，但在240℃炒20min时萝卜硫苷的含量开始下降，在240℃30in时未能检出萝卜硫苷，样品也同时开始由炒香往炒焦过度，表明炒制时间太长，温度过高，萝卜硫苷也同时被破坏分解。

上述结果表明温度在莱菔子的炮制过程中影响较大，总体在200℃20min为分界线，萝卜硫苷开始检出，莱菔素含量迅速下降，芥子酸开始不能检出，而芥子碱硫氰酸盐则影响不大，表明炒制前后化学成分含量差异较大，萝卜硫苷是莱菔子炒制是否达到炮制要求的一个标志性成分，通过炮制研究含量测定的结果可以，选择240℃炒10in为莱菔子的炮制工艺，既能有效的保留芥子碱硫氰酸盐的含量同时也有效的抑制芥子酶保留了萝卜硫苷不被分解，达到炒后熟降，用于消食除胀、降气化痰的功效。

不同炒制温度-时间莱菔子整体图谱对比

研究过程中发现莱菔子在200℃炒20in、30min、40min和240℃炒10in、炒20min时可以检出萝卜硫苷，240℃炒10in时萝卜硫苷的含量达到峰值，能完全杀灭芥子酶，进一步证明萝卜硫苷可作为莱菔子炒制是否达到炮制要求的一个标志性成分，文献报道用特征图谱分析莱菔子饮片的酶解过程化学成分的变化，但不同炒制温度-时间中炒制过程水提物中化学成分整体情况未见文献报道，整体图谱可较全的反应莱菔子水提物组分的群体特征，通过了解不同炒制温度-时间莱菔子整体图谱的动态规律，获得炒制温度-时间对莱菔子中化学成分的动态变化影响因素，从而为莱菔子的临床应用提供参考。

从图8可以看出，200℃炒20in时开始抑制硫代葡萄糖苷酶(芥子酶)，水提取样品能检出少量萝卜硫苷，但仅抑制部分芥子酶，未能完全杀灭芥子酶，在240℃炒10in时萝卜硫苷的含量达到峰值，表明该温度完全灭活芥子酶，但在240℃炒20min时萝卜硫苷的含量开始下降。

实施例2市售莱菔子炒制前后化学成分变化研究

根据不同炒制温度-时间莱菔子中化学成分的研究结果选择莱菔子的炒制工艺240℃炒10min对市售12批来源于不同产地的莱菔子进行炮制，得12批不同产地的莱菔子炒制样品，编号为c1-c12。采用拟定的含量测定方法测定炒制后12个样品中萝卜硫苷、芥子碱硫氰酸盐、莱菔素和芥子酸的含量，同时对其炒制前后特征图谱进行研究，标定特征峰，归属色谱峰，验证确定的炒制工艺对市售生品炒制前后化学成分的影响变化规律是否一致，一定程度上探讨该炒制工艺的科学性和合理性。

市售莱菔子炒制前后的含量测定

基于药典方法测定市售莱菔子炒制前后芥子碱硫氰酸盐的含量

测定12个市售生莱菔子和炒制后莱菔子中芥子碱硫氰酸盐的含量，测定结果见表3。

表3市售生莱菔子及炒制品中芥子碱硫氰酸盐的含量测定结果

表3和图9-12可以看出，按拟定炮制工艺炒不同批次莱菔子后，炒制后莱菔子中芥子碱硫氰酸盐较生品含量略高，更容易提取测定，其中药典方法测定生品中芥子碱硫氰酸盐含量变化范围0.34％～0.65％，炮制品中含量变化范围为0.35％～0.73％。

基于水提取同时测定市售莱菔子炒制前后萝卜硫苷、芥子碱硫氰酸盐、莱菔素和芥子酸的含量

对12批生莱菔子及其炒制品中萝卜硫苷、芥子碱硫氰酸盐、莱菔素和芥子酸的含量进行测定，对照品和样品色谱图见图12，测定结果见表4、5和图12、13。

表4市售莱菔子生品中萝卜硫苷、芥子碱硫氰酸盐、莱菔素和芥子酸的含量

表13市售莱菔子炒制品中萝卜硫苷、芥子碱硫氰酸盐、莱菔素和芥子酸的含量

从表4、5，图13、14可以看出，水提取莱菔子样品中，生莱菔子中可检出芥子碱硫氰酸盐、莱菔素和芥子酸，未能检出萝卜硫苷；莱菔子炒制品(240℃炒10in)中可检出萝卜硫苷、芥子碱硫氰酸盐，未能检出莱菔素和芥子酸，测定结果与不同炒制温度-时间莱菔子的测定结果一致；生莱菔子中芥子碱硫氰酸盐含量变化范围为0.21％～0.36％，莱菔素含量变化范围为0.8％～1.61％，芥子酸含量变化范围为0.02％～0.05％；莱菔子炒制品萝卜硫苷含量变化范围为2.70％～4.52％，芥子碱硫氰酸盐含量范围从0.29％～0.51％。

利用选定的炮制工艺240℃炒10in对市售莱菔子进行炮制后，测定结果与不同温度-时间莱菔子中240℃炒10in的测定结果一致，炮制后萝卜硫苷的含量超过2％，表明选定的炮制工艺合理，可对市售生莱菔子的炮制提供参考。

实施例3基于水提取同时测定不同炒制温度-时间莱菔子中萝卜硫苷、芥子碱硫氰酸盐、莱菔素和芥子酸的含量

对同一批生莱菔子和炒制后16个莱菔子中萝卜硫苷、芥子碱硫氰酸盐、莱菔素和芥子酸的含量进行测定，测定结果见表10。

表10不同炒制温度-时间莱菔子的含量测定结果(n＝2)

从表10和图15可以看出，莱菔素在70℃炒10min、20min、30min、40min中含量变化不大，在90℃炒10min、20min、30min、40min时和110℃炒10min含量略高于70℃炒制相应温度，在110℃炒20min时含量迅速下降，110℃炒30min时由于温度过高，被破坏，未能检出；芥子酸在70℃炒10min、20min、30min、40min和90℃炒10min时含量变化不大，90℃炒20min开始含量下降一倍，在90℃炒20min、30min、40min时和110℃炒10min时含量保持不变，在110℃炒20min时由于温度过高，被破坏，未能检出。

据文献报道，莱菔子生品研磨冲服或者温水调服过程中化学成分会发生酶(芥子酶)解，加热炒制可抑制其所含硫代葡萄糖苷分解酶的活性，从而达到杀酶保苷的效果，发挥莱菔子生升熟降，生熟异治的功效，从表10和图11-12可以看出，70℃炒10min、20min、30min、40min和90℃炒10min、20min、30min、40min，110℃炒10min时水提样品未能检出萝卜硫苷，110℃炒20in时开始抑制硫代葡萄糖苷酶(芥子酶)，水提取样品能检出少量萝卜硫苷，但仅抑制部分芥子酶，未能完全杀灭芥子酶，在130℃炒10in时萝卜硫苷的含量达到峰值，表明该温度完全灭活芥子酶，但在130℃炒20min时萝卜硫苷的含量开始下降，在130℃30in时未能检出萝卜硫苷，样品也同时开始由炒香往炒焦过度，表明炒制时间太长，温度过高，萝卜硫苷也同时被破坏分解。

上述结果表明温度在莱菔子的炮制过程中影响较大，总体在110℃20min为分界线，萝卜硫苷开始检出，莱菔素含量迅速下降，芥子酸开始不能检出，而芥子碱硫氰酸盐则影响不大，表明炒制前后化学成分含量差异较大，萝卜硫苷是莱菔子炒制是否达到炮制要求的一个标志性成分，通过炮制研究含量测定的结果可以，选择130℃炒10in为莱菔子的炮制工艺，既能有效的保留芥子碱硫氰酸盐的含量同时也有效的抑制芥子酶保留了萝卜硫苷不被分解，达到炒后熟降，用于消食除胀、降气化痰的功效。

不同炒制温度-时间莱菔子整体图谱对比

研究过程中发现莱菔子在110℃炒20in、30min、40min和130℃炒10in、炒20min时可以检出萝卜硫苷，130℃炒10in时萝卜硫苷的含量达到峰值，能完全杀灭芥子酶，进一步证明萝卜硫苷可作为莱菔子炒制是否达到炮制要求的一个标志性成分，文献报道用特征图谱分析莱菔子饮片的酶解过程化学成分的变化，但不同炒制温度-时间中炒制过程水提物中化学成分整体情况未见文献报道，整体图谱可较全的反应莱菔子水提物组分的群体特征，通过了解不同炒制温度-时间莱菔子整体图谱的动态规律，获得炒制温度-时间对莱菔子中化学成分的动态变化影响因素，从而为莱菔子的临床应用提供参考。

从图16可以看出，110℃炒20in时开始抑制硫代葡萄糖苷酶(芥子酶)，水提取样品能检出少量萝卜硫苷，但仅抑制部分芥子酶，未能完全杀灭芥子酶，在130℃炒10in时萝卜硫苷的含量达到峰值，表明该温度完全灭活芥子酶，但在130℃炒20min时萝卜硫苷的含量开始下降。

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