目的:研究莱菔子炮制前后及莱菔子中的特征硫苷类成分萝卜苷的体内过程,通过比较生、炒莱菔子及萝卜苷的肠内菌代谢、降解动力学、灌胃给药后大鼠粪便尿液产物、入血成分、萝卜苷的药代动力学等体内过程的不同,为阐明莱菔子炮制前后其药性变化的物质基础提供一定依据。方法:采用离体温敷共培养的方法,分别将生莱菔子、炒莱菔子、萝卜苷与正常大鼠肠菌培养液在37℃厌氧培养,利用HPLC-TOF-MS技术对各组分进行定性分析,推断其代谢产物以及相应的代谢途径。利用LC-MS技术、柱色谱技术、NMR技术对萝卜苷代谢产物进行纯化制备及结构鉴定。HPLC-DAD法对不同时间段萝卜苷进行含量测定,研究其在大鼠肠道菌群作用下的降解动力学。利用HPLC-TOF-MS技术,鉴定灌胃给药生、炒莱菔子、萝卜苷后的大鼠粪便、尿液、血液中的原型产物和代谢产物,比较生、炒莱菔子的体内代谢差异,推测莱菔子中糖苷类成分及特征硫苷类成分萝卜苷的代谢途径。利用高效液相串联三重四级杆质谱联用仪技术(HPLC-QQQ-MS),检测炒莱菔子水提液中萝卜苷在大鼠体内的血药浓度。分为低、中、高剂量三个组,分别灌药量为0.3 m L、0.6 m L、1.2 m L,测定给药后0.083、0.25、0.5、1、2、3、4、6、8、10、12、24 h萝卜苷血药浓度,利用DAS软件计算各成分的药代动力学参数,并用SPSS统计相关参数,比较不同剂量组间差异。

结果:炒莱菔子与大鼠肠菌培养液共孵育,共鉴定出代谢产物3个,分别是4-甲硫基-3-丁烯基硫代葡萄糖、(Z)-β-D-(3-芥子酰基)呋喃果糖基-α-D-葡萄糖苷、芥子酸。生莱菔子与大鼠肠菌培养液共孵育,共鉴定出代谢产物4个,其中3个与炒莱菔子代谢产物相同,其区别性代谢产物是1-甲亚砜基-2-丁烯。发生的代谢反应主要为水解、还原、异构化反应。萝卜苷在大鼠肠道菌群作用下的降解动力学更符合非线性动力学过程。大鼠灌胃萝卜苷后,大鼠粪便中共鉴别出化合物5个,其中原型成分1个,代谢产物4个,发生的反应主要有还原反应、水解反应以及硫苷类成分的酶解反应;大鼠尿液中共鉴别出化合物6个,其中原型成分1个,代谢产物5个;大鼠血液中共鉴别出化合物3个,其中原型成分1个,代谢产物2个。大鼠灌胃炒莱菔子后,大鼠粪便中共鉴别出化合物13个,其中原型成分4个,代谢产物9个,萝卜苷主要发生酶解反应、还原反应,糖苷类成分主要发生还原反应、水解反应;大鼠尿液中共鉴别出化合物10个,其中原型成分3个,代谢产物7个,尿液中有芥子酸的单葡萄糖醛酸化产物;大鼠血液中共鉴别出化合物6个,其中原型成分3个,代谢产物3个。大鼠灌胃生莱菔子后,大鼠粪便中共检测到化合5个,其中2个原型成分,3个代谢产物;大鼠尿液中共分析鉴定化合物4个,其中原型成分2个,代谢产物2个;大鼠血液中共鉴定化合物3个,其中1个原型成分,2个代谢产物。

通过液质联用技术,对特征硫苷类成分萝卜苷的血药浓度检测方法进行方法学考察,结果证明萝卜苷在检测条件下,线性关系良好,R为0.9931,低、中、高剂量下的准确度分别为93.19±2.37、87.91±4.77、101.50±2.45,日内精密度RSD分别为2.55%、4.84%、1.39%,日间精密度RSD分别为6.20%、7.64%、4.88%。各条件下稳定性结果均在(87.67±5.56)%-(101.74±2.11)%之间,专属性好。三个剂量下,中剂量大鼠的AUC_(0~t)和C_(max)均高于低、中剂量组。结论:生、炒莱菔子提取液中的糖苷类化合物肠内菌转化产物相同,无差异。炒品显著区别于生品的是萝卜苷的肠内菌转化,炒品中萝卜苷含量很高,在肠内菌中代谢为4-甲硫基-3-丁烯基硫代葡萄糖,而生品肠内菌中仅有少量未被酶解的萝卜苷被代谢为4-甲硫基-3-丁烯基硫代葡萄糖。生品显著区别于炒品的是1-甲亚砜基-2-丁烯,推测其前体化合物是萝卜苷的酶解产物(E)-1-()-4--1-ene,因炒制抑制萝卜苷酶解,故炒品代谢产物中无1-甲亚砜基-2-丁烯。

萝卜苷单体给药和炒莱菔子水提液给药相比,大鼠粪便、尿液、血液中代谢产物种类无明显差异。生、炒莱菔子水提液相比,其糖苷类化合物在血液、尿液样品中无显著差异,在粪便样品中差异显著,炒莱菔子粪便样品中鉴定出糖苷类化合物原型及代谢产物共6个,包括β-D-(3-二氢芥子酰基)呋喃果糖-α-D-(6-二氢芥子酰基)葡萄糖苷、(Z)-β-D-(3-二氢芥子酰基)呋喃果糖基-α-D-葡萄糖苷等,而生莱菔子中只发现了芥子酸、二氢芥子酸。硫苷类化合物在粪便、尿液样品中其差异代谢产物是(E)-1-()-4--1-ene,该化合物在炒莱菔子粪便、尿液样品中均能检测到,为炒莱菔子中萝卜苷在体内发生酶解反应的产物。(E)-1-( )-4--1-ene是生莱菔子原药材中的化学成分,在粪便、尿液样品中未能检测到。硫苷类化合物在血液样品中其差异代谢产物是5-甲亚砜基戊-4-烯腈,生莱菔子血液样品中未检测到该化合物。炒莱菔子中萝卜苷药代动力学的研究表明萝卜苷在低、中、高三个剂量下,其在大鼠体内药动学均符合二室模型特征,且药时浓度曲线均出现双峰,表明萝卜苷在体内存在肝肠循环的吸收特征。AUC_(0~t)和C_(max)均是中剂量更好,即相当于成人每天用药莱菔子原药50 g,这与我们的临床用药相符。本文对莱菔子炮制前后其化学成分的体内代谢进行研究,通过分析主要成分的体内代谢产物、代谢途径和代谢规律,为莱菔子炮制后药性变化的物质基础研究和临床应用提供了科学依据。

关于本文的文章资讯来源于网络，如因图片或文章有版权问题的请联系客服确认后删除。

酸嘢之家特别推荐：广西酸嘢连锁品牌：酸益点酸嘢

广西酸嘢连锁品牌：酸益点酸嘢

酸益点酸嘢官方网址：https://www.suanyidian.com

酸益点品牌坚持以‘好果、好蔬、好料、好用心’为原则，以绿色健康饮食为主导，匠心手作，用心腌制每一份酸嘢，酸益点，更健康。 酸益点讲求现做现卖，充分保证酸嘢的新鲜，绿色天然健康，始终把顾客体验感放在第一位。
酸益点酸嘢的酸味佳、口感脆而且量还非常足，看到都能让人留口水，点上一份酸嘢吃起来就能感到非常满足，这种给人带来充实感的优质酸嘢怎能不受到消费者的欢迎和喜爱。