一、实验目的要求

1、进一步加强学习、掌握玻璃瓶、试剂瓶的清洗、烘干、包扎的包扎技术。

2、为下一次的玻璃瓶、试剂瓶_的准备工作。

二、原理

为确保实验顺利地进行，要求把实验所用的玻璃瓶清洗干净。为保持_后和无菌状态，需要对培养皿、吸管等进行包扎，对试管和三角瓶等加塞棉塞。这些工作看起来很普通简单，但如操作不当或不安操作规定去做，则会影响实验结果，甚至会导致试验的失败。

_原理：高压蒸汽_是将待_的物品放在一个密闭的加压_锅内，通过加热，使_锅隔套间的水沸腾而产生蒸汽。待水蒸汽急剧地将锅内的冷空气从排气阀中驱尽，然后关闭排气阀，继续加热，此时由于蒸汽不能溢出，而增加了_器内的压力，从而使沸点增高，得到高于100℃的温度。导致菌体蛋白质凝固变性而达到_的目的。适用于一般培养基、玻璃瓶、试剂瓶、无菌水、金属用具。一般培养基在121．3℃_20分钟即可。干热_是利用高温使微生物细胞内的蛋白质凝固变性而达到_的目的。细胞内的蛋白质凝固性与其本身的含水量有关，在菌体受热时，当环境和细胞内含水量越大，则蛋白质凝固_越快，反之含水量越小，凝固缓慢。因此，与湿热_相比，干热_所需温度高（160—170℃），时间长（1—2小时）。但干热_温度不能_180℃，否则，包器皿的纸或棉塞_会烤焦，甚至引起燃烧，因而一般塑料制品不能用干热_。

三、试剂瓶和仪器

（一）仪器

高压蒸汽_锅、电热烘箱、试管、三角瓶、培养皿和吸管、棉线、纱布、棉花、牛皮纸、报纸、硅胶塞等

四、实验内容

（一）玻璃瓶、试剂瓶的清洗：

新购的玻璃器皿的洗涤

将器皿放入２％盐酸溶液中浸泡数小时，以除去游离的碱性物质，_后用流水冲净。

对容量较大的器皿，如大烧瓶、量筒等，洗净后注入浓盐酸少许，转动容器使其内部表面均沾有盐酸，数分钟后倾去盐酸，再以流水冲净，倒置于洗涤架上晾干，即可使用。

常用旧玻璃器皿的洗涤

确实无病原菌或未被带菌物污染的器皿，使用前后，可按常规用洗衣粉水进行刷洗；

吸取过化学试剂的吸管，先浸泡于清水中，待到_数量后再集中进行清洗。

带菌玻璃器皿的洗涤

凡实验室用过的菌种以及带有活菌的各种玻璃器皿，_经过高温_或消毒后才能进行刷洗：

1、带菌培养皿、试管、三角瓶等物品，做完实验后放入消毒桶内，用0.～30min后再刷洗。含菌培养皿的_，底盖要分开放入不同的桶中，再进行高压_。

2、带菌的吸管、滴管，使用后不得放在桌子上，立即分别放入盛有3～5%来苏尔或5%石炭酸或0.25%新洁尔灭溶液的玻璃缸（筒）内消毒24h后，再经0.后，取出冲洗。

3、带菌载玻片及盖玻片，使用后不得放在桌子上，立即分别放入盛有3～5%来苏尔或5%石炭酸或0.25%新洁尔灭溶液的玻璃缸（筒）内消毒24h后，用夹子取出经清水冲干净。

如用于细菌染色的载玻片，要放入50g/L肥皂水中煮沸10min，然后用肥皂水洗，再用清水洗干净。

_后将载玻片浸入95%酒精中片刻，取出用软布擦干，或晾干，保存备用。

若用皂液不能洗净的器皿，可用洗液浸泡适当时间后再用清水洗净。

4、含油脂带菌器材的清洗

单独高压_：用0.～30min→趁热倒去污物→倒放在铺有吸水纸的篮子上→用100℃烘烤0.5h→用5%的碳酸氢钠水煮两次→再用肥皂水刷洗干净。

（二）、玻璃瓶、试剂瓶的晾干或烘干

不急用的玻璃瓶：可放在实验室中自然晾干；

急用的玻璃器瓶：把器材放在托盘中（大件的器材可直接放入烘箱中），再放入烘箱内，用80～120℃烘干，当温度下降到60℃以下再打开取出器材使用。

（三）玻璃瓶的包扎：

要_后的玻璃瓶仍保持无菌状态，需在_前进行包扎。

（1）培养皿：洗净的培养皿烘干后每10套（或根据需要而定）叠在一起，用牢固的纸卷成一筒，或装入特制的铁桶中，然后进行_。

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